反相柱与正相柱的区别

正相柱和反相柱源于柱上固定相与流动相之间极性的对比。若固定相极性大于流动相，为正相柱，反之，为反相柱，通常反相柱应用较多。

　　现在一般都用反相柱，正相在样品中对水敏感等特殊情况下才使用。正相的固定性是极性的，流动相是非极性的，适于分离强极性物质。反相的固定性是非极性的，流动相是极性的，适于分离弱极性物质。

　　二者本质上是填料(固定相)的不同,正相色谱柱填料极性强,洗脱顺序由弱到强；反相柱填料极性弱，洗脱顺序由强到弱。

　　1.正相柱固相相通常为硅胶（Silica）以及其他具有极性官能团氨基团，如（NH2，APS）和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。

　　由于硅胶表面的硅羟基（SiOH）或其他极性基团极性较强，因此，分离的次序是依据样品中各组分的极性大小，即极性较弱的组份先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如正已烷（Hexane），二氯甲烷（Methylene Chloride）等。

　　2.反相柱固定相通常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反相色谱所使用的流动相极性较强，通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分先被冲洗出，而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。

常用的反相填料有：C18（ODS）、C8（MOS）、C4（Butyl）、C6H5（Phenyl）等。

常用的正相填料有：Silica（硅胶）、NH2（氨基）、APS、CN 、CPS等。

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